手把手教学｜多重荧光免疫组织化学 (三)：注意事项

文章预览

在进行mIHC实验过程中，研究者可能会遇到各种问题，本文将详细探讨这些问题及其注意事项，帮助研究者顺利完成实验并获得可靠结果。 1. 一抗和二抗的选择及稀释 一抗和二抗的选择及其稀释浓度对实验结果至关重要。选择不当或稀释不准确会导致假阴性或假阳性结果。 注意事项： 先通过常规免疫组化优化并明确一抗、二抗的稀释比，再进行mIHC染色。mIHC染色的一抗浓度应小于常规免疫组化染色浓度。根据DAB显色时间进一步稀释一抗。例如，DAB显色时间为20-30秒，则一抗稀释比进一步稀释2倍。 2. 对照实验的重要性 缺乏对照实验会影响结果的准确性，无法证实抗体效价和检测系统的可靠性。 注意事项： 在每次染色过程中必须做对照实验，包括阳性组织对照、阴性组织对照和阴性试剂对照。对照实验能有效避免试剂失效或操作失当导致的假阴性 ………………………………