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手把手教学|MTT实验检测细胞活性

实验老司机  · 公众号  ·  · 2024-09-08 07:00

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一、实验原理 MTT实验的原理依赖于细胞内琥珀酸脱氢酶的活性。这种酶能催化MTT分子在细胞内的还原过程,形成水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中。活细胞具有此酶的功能,因此能够产生甲瓒结晶,而死细胞缺乏这种功能。二甲基亚砜(DMSO)被用来溶解细胞内的甲瓒结晶。通过酶标仪在490nm或570nm波长处测定甲瓒溶解后的光吸收值。 在一定细胞数量范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。因此,透过测定的光密度值(即OD值),我们能够推断出活跃细胞的数目。高OD值代表着细胞的活性较高,而低OD值可能意味着细胞数量较为稀少或者细胞的活性较为低下。在药物毒性评估方面,高OD值则意味着药物的毒性较小。 主要用途: 1、评估细胞活性和增殖能力:MTT实验可用于评估细胞的活性和增殖能力。通过测量MTT还原产生的紫色 ………………………………

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