文章预览
由化脓性链球菌Cas9 nickase (nSpCas9)和Moloney小鼠白血病病毒逆转录酶(M-MLV RT)组成的先导编辑系统与先导编辑指导RNA (pegRNA)合作,促进活细胞中各种精确的基因组编辑。 然而,由于缺乏结构信息,先导编辑器引导pegRNA逆转录的分子机制仍然知之甚少。 2024年5月29日,东京大学Osamu Nureki及博德研究所张锋等团队合作在 Nature 在线发表题为“ Structural basis for pegRNA-guided reverse transcription by a prime editor ”的研究论文,该研究展示了 SpCas9-M-MLV RTΔRNaseH-pegRNA-target DNA复合物在多种状态下的冷冻电镜结构。 终止结构以及功能分析表明,M-MLV RT将逆转录延伸到预期位点之外,导致支架衍生的结合,从而在目标位点上引起不希望的编辑。 对起始前、起始和延伸状态的结构比较表明,M-MLV RT在逆转录过程中相对于SpCas9保持一致的位置,而pegRNA合成的DNA 杂化双链 则沿着SpCas9
………………………………