手把手教学｜细胞消化和传代经验分享

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一、 准备工作 1、试剂准备： 培养细胞所需的培养基、胰酶、胎牛血清（简称FBS）、双抗（简称P/S）、PBS缓冲液等从4℃的冰箱中取出，于室温条件下放置至恢复室温。 2、耗材准备 ：50mL离心管、15mL离心管等及移液枪。 3、实验条件准备： 打开超净台紫外灯照射30mins之后通风3-5mins即可开始实验。 二、实验步骤 1、洁净要求： 进入细胞间后，穿好实验服，戴好口罩手套等实验装备，将上述试剂耗材用酒精喷洗后放入超净台，手部同样酒精喷洗即可开始。 2、试剂分装及配制： （1） 配制完全培养基： 完全培养基（血清占总体积10 %，双抗占总体积1%的基础培养基混合液）一般用50ml离心管配制，减少污染的概率。即在50mL离心管中加入5mL FBS和500μL P/S后倒入基础培养基定容到50mL，即得50mL完全培养基。用马克笔在离心管壁上写好配制时间及溶液成分。放 ………………………………