实验六 | 重组DNA的转化(知识分享)

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图片来源：网络 重组DNA的转化 是指将体外连接的DNA分子引入受体细胞(如大肠杆菌、枯草杆菌等)中，使其在细胞内扩增并研究其功能的表达。这一过程通常包括感受态细胞的制备、DNA的加入、热激处理以及转化细胞的筛选等步骤。 实验目的 学习并掌握将体外重组DNA导入受体细胞以及筛选重组子的方法。 实验原理 将外源 DNA 分子导入某一宿主细胞的过程称为转化(transformation)。当细菌处于容易吸收外源DNA的状态(也称为感受态)时，转化最容易发生。 制备感受态常用的方法是氯化钙法，即用CaCl2处理受体细菌，使细胞进入一种敏感的生理状态。 当细菌细胞和连接产物处于冰冷(0℃)的CaCl2溶液中，细胞膨胀成球形，连接产物中的DNA与氯化钙形成能抵抗DNase的羟基-钙磷酸复合物并黏附于细胞的表面。经42℃短时间热激处理后，外源DNA容易被细胞吸收。转化 ………………………………