实验解析｜免疫荧光染色实验的注意事项

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1、石蜡切片的质量直接关系到免疫荧光的染色效果。因此，石蜡切片最好交由技术熟练的人员操作，新手可能会存在即便将切片机调整至 3 μ m 但实际厚度远大于 3 μ m 的情况，从而导致切片太厚，细胞层叠，影响观察。亦有可能因技术不熟练而破坏组织结构，影响实验效果； （刀片变钝，明场下明显的刀痕） （切片太厚，细胞堆叠） 2、在进行抗原修复时，要尽量使抗原修复液没过载玻片，以防加热过程中过度挥发导致干片，同样，在其他操作时也因避免干片现象出现，否则可能会造成高背景及非特异性标记； 3、使用组化笔画圈时，最好离组织稍微远一点，否则组化笔中的物质也有可能附着在组织上，影响染色效果。该操作主要是起到一个阻隔的作用，主要目的是防止液体外溢。在画圈时需要注意稍微等组化圈干一会儿再进行滴加所需物质， ………………………………