Protocol分享‖琼脂糖凝胶电泳——一种用于分离、鉴定和提纯RNA/DNA片段的标准方法

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一、实验原理 利用电流根据DNA或RNA片段的大小进行分离，施加电流后带负电的DNA或RNA向凝胶带正电的一端迁移[1]，较小的片段迁移较快，大片段迁移较慢，产生的条带可在紫外光下观察。 琼脂糖是一种从红藻中发现的碳水化合物 ，其在凝胶中的百分比，影响了孔的大小，进而影响了可能通过的分子大小和通过速度，琼脂糖的百分比越高，孔径越小，因此 能够通过的分子越小，迁移速度越慢 。 低百分比琼脂糖凝胶用于分离较大的条带，高百分比琼脂糖凝胶用于分离较小的条带。 后文以RNA琼脂糖凝胶电泳为例。 二、具体操作步骤 配胶 1.准备好洗净后的锥形瓶、量筒或烧杯、称量纸、药匙。 2.按照所需的琼脂糖浓度溶解琼脂糖粉末（通常是 1-2% ）。这里以1%为例，称量0.5g琼脂糖粉末放入锥形瓶，加入1×TAE或TBE缓冲液定容至50ml，在锥形瓶口裹上保鲜 ………………………………