文章预览
一、实验原理 利用电流根据DNA或RNA片段的大小进行分离,施加电流后带负电的DNA或RNA向凝胶带正电的一端迁移[1],较小的片段迁移较快,大片段迁移较慢,产生的条带可在紫外光下观察。 琼脂糖是一种从红藻中发现的碳水化合物 ,其在凝胶中的百分比,影响了孔的大小,进而影响了可能通过的分子大小和通过速度,琼脂糖的百分比越高,孔径越小,因此 能够通过的分子越小,迁移速度越慢 。 低百分比琼脂糖凝胶用于分离较大的条带,高百分比琼脂糖凝胶用于分离较小的条带。 后文以RNA琼脂糖凝胶电泳为例。 二、具体操作步骤 配胶 1.准备好洗净后的锥形瓶、量筒或烧杯、称量纸、药匙。 2.按照所需的琼脂糖浓度溶解琼脂糖粉末(通常是 1-2% )。这里以1%为例,称量0.5g琼脂糖粉末放入锥形瓶,加入1×TAE或TBE缓冲液定容至50ml,在锥形瓶口裹上保鲜
………………………………