寡核苷酸合成的底层技术 – 亚磷酰胺三酯合成法

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寡核苷酸合成的底层技术 亚磷酰胺三酯合成法 寡核苷酸合成是许多分子生物学应用的基础，包括聚合酶链反应（PCR）、基因编辑、DNA测序和治疗/药物输送。在过去35年里，我们在诊断检测、生物技术和药理学方面所看到的科学进步，部分是由寡核苷酸合成方面的进展所支持的。 现今大多数商业化DNA合成仪所使用的底层技术是亚磷酰胺三酯合成法（如图一），一般称为柱式合成。此方法具有高效、快速偶联等优点，在DNA化学合成中广泛使用。 DNA化学合成不同于酶促的DNA合成过程从5’→3’方向延伸，而是由3’端开始。先将酸活化的脱氧核苷亚磷酰胺分子耦合到一个固定在固相（一般是硅材质表面）的脱氧核苷酸分子上。在第一个合成循环中，核苷酸链从第一个固定在表面上受保护的核苷酸分子开始延伸。其中，经常采用的固定化表面主要是可控孔 ………………………………