（超）多重PCR的技术门槛，到底高不高？

文章预览

文章来源于 科研入门狗 ，作者 Lemon wl （超）多重PCR的技术门槛到底高不高，做过PCR的人都明白，做单重PCR都会有二聚体和非特异扩增的存在，更何况一管内扩增几千重，那二聚体和非特异扩增简直就是灾难级别的，根本看不到目标条带，二聚体完全掩盖住了目标条带扩增。目前，突破多重PCR技术壁垒，基本可以归纳为2个方向：生信设计和实验改造。 一、生信算法 很多科研团队开发了很多多重PCR引物的算法和软件，如下表， MultiPLX 计算现有PCR引物的相容性评分，并对多重PCR引物进行分组； Oli2go 将多个序列作为输入，为所有序列设计多重引物和探针，其特异性检查不仅限于单个物种，而且可以在多种物种上进行； MPprimer和PrimerStation 设计多重引物组，其扩增子的大小不同，以便通过电泳分离； MCMC-ODPR 采用Markov chain Monte Carlo优化方法，围绕单核苷 ………………………………