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在上一期内容中,我们探讨了三种用于无柱蛋白质表达和纯化的聚集标签。这些标签分为以下三类:(i) 能够诱导体内形成无活性蛋白质聚集体的标签;(ii) 能够诱导体内形成活性蛋白质聚集体的标签;(iii) 能够诱导体内形成可溶性表达但在体外形成聚集体的标签。对于第一类标签,目标蛋白需要经过复性过程才能恢复其活性,而第三类标签则需要通过调整温度和盐浓度来实现相变,这不仅增加了纯化的时间和复杂性,也限制了它们的应用范围。相比之下,第二类标签诱导形成的蛋白质聚集体具有活性,无需复性即可直接使用,且可以通过简单的离心或过滤步骤来分离和纯化目标蛋白,这使得它们具有广泛的应用前景。 在本期内容中,将详细介绍基于第二类标签的标准方案,即cSAT1.0。 这一方案因其简便性和高效性,为蛋白质的表达和纯化提供了一
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