手把手教学｜如何用流式细胞仪分选T细胞

文章预览

一、实验原理 流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）是一种单细胞定量分析技术， 该技术通过测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收等参数，可以定量分析 细胞的结构特征（如DNA含量、蛋白、细胞膜、胞浆或胞核抗原表达量）和功能特征（如细胞内酶活性、钙流变化等） 等多种重要参数 ，进行细胞特征分析与分选。它的核心功能是将混合物中的不同细胞分离并计数，将感兴趣的细胞分选出来，提供分类比例并进行进一步分析。 二、实验步骤 （一）样本制备 1.取样: 取100μL抗凝血。 2.标记：根据抗体说明书标记实验管。混匀后，室温避光孵育15分钟。 3. 溶血：将10×裂红液用水稀释10倍，每管加入1mL，振荡器混匀后室温避光静置10分钟，300g，4°C离心5分钟。 4. 洗涤：弃去上清，加入1mL 1×PBS洗液，300g离心洗涤5分钟，洗2-3次。 5. 上机检测：弃去上清后加 ………………………………