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【业务介绍】DNA Pull-down/DNA Pull-down MS

伯远生物  · 公众号  ·  · 2024-08-28 09:00

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背景介绍 转录调控是指以DNA为模板合成RNA的调控。所有的细胞都具有大量的DNA结合蛋白(反式作用因子),这些蛋白质能准确地识别并结合特异的DNA序列(顺式作用元件),在转录水平上起着“开关”的作用。反式作用因子和顺式作用元件之间的相互作用是转录水平基因表达调控的分子基础。研究DNA与蛋白质的相互作用有许多实验方法, 其中DNA Pull-down是体外研究DNA与蛋白互作的有效方法,常用于验证目的基因启动子与转录因子的相互作用,而寻找上游转录因子需要与液相色谱-质谱技术(LC-MS)联用,即DNA Pull-down MS。 原理简介 DNA Pull-down 首先 在体外制备针对 DNA 目标区域的脱硫生物素标记的特异性 DNA 探针 ,该探针可以 与偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与 DNA 探针孵育,互作蛋白质可以和 DNA 探针特异性结合;利用链霉亲和素磁珠 ………………………………

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