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科研干货|qPCR扩增曲线和熔解曲线怎么解读!

生命科学技术摘集  · 公众号  ·  · 2024-10-13 07:57
    

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一、扩增曲线的解读 1. 扩增曲线的 横坐标 :扩增曲线是一项关键的技术。在分析PCR扩增反应过程中,我们通常使用 循环数 作为扩增曲线的横坐标,而以△Rn作为纵坐标。 扩增曲线的 纵坐标 : △Rn是 SYBR 绿染料荧光信号与参比荧光信号(例如 ROX 系列染料)的比值。一般来说,我们通过将某一Rn值减去基线区域相对应的Rn值来计算△Rn值。通过观察PCR扩增曲线的△Rn值,我们可以更准确地判断扩增反应的特性和效果。因此,在实验过程中正确理解和分析扩增曲线的曲线特征对于研究结果的准确性和可靠性至关重要 2. 将纵坐标改为 对数坐标轴 后,扩增曲线呈现出另一种形态,使得曲线的基线看起来更加杂乱。然而,这种变化更有利于区分曲线在四个时期内的变化。在对数坐标轴上观察曲线可以更清晰地展示数据的趋势。 ① 基线期: 是曲线起始阶段, ………………………………

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