手把手教学｜Pull-down实验

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实验原理： Pull-down实验是一种常用于研究蛋白质相互作用的技术。其基本原理是利用蛋白质之间的特异性相互作用来筛选和鉴定与感兴趣蛋白相互作用的蛋白质。在实验中，首先将感兴趣的蛋白质（通常是已知的蛋白质）与特定的标签（如GST、HIS等）融合，并表达在宿主细胞中。然后，将这些标记蛋白与细胞提取物或重组蛋白混合，使它们在体外环境中进行相互作用。 在混合过程中，与标记蛋白质相互作用的其他蛋白质会结合到标记蛋白质上形成复合物。未结合的蛋白质被洗脱，留下与标记蛋白质相互作用的蛋白质。最后，通过分析技术（如Western blotting、质谱分析等），可以鉴定和定量与标记蛋白质相互作用的蛋白质，从而揭示它们之间的相互作用。 Pull-down实验的基本原理是基于蛋白质之间的特异性和亲和性相互作用。通过选择适当的标签和实 ………………………………