科研进展 | 清华大学李雪明/沈渊课题组合作开发冷冻电子断层成像倾转系列的离焦量测量方法

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加 星标 ，再也不怕错过更新！方法见文末动图。 冷冻电子断层成像 （cryo-electron tomography, cryoET） 技术可以观察细胞中生物大分子的原位结构，近年来受到了广泛关注。生物样品在冷冻电镜成像的过程中受到衬度传递函数 （contrast transfer function, CTF） 的影响，无法直接反映原始的结构信息。在实现高分辨率的蛋白质结构解析和电镜图像质量评估的过程中，依托CTF准确估计离焦量参数，对后续消除CTF的影响十分重要。目前常用的离焦量估计方法通常依托图像功率谱中的CTF衍射环 （Thon ring） 进行估计。冷冻电子断层成像倾转系列图像信噪比非常低，且由于样品倾转引起照片中的离焦量随样品高度连续变化。这些因素导致高倾转角度下拍摄的电镜照片功率谱中没有清晰的CTF衍射环，导致难以精确估计样品的成像离焦量。此外，通过冷冻聚焦离子束 （cry ………………………………