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多重PCR探针荧光基团选择的4项基本原则

生命科学技术摘集  · 公众号  ·  · 2024-10-09 07:44

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在多重PCR(multiplex PCR)中,探针荧光基团的选择是一项至关重要的步骤,它直接关系到实验结果的准确性和可靠性。多重PCR技术能够在同一PCR反应体系里加上两对或以上的引物,同时扩增出多个核酸片段,极大地提高了实验效率和通量。然而,由于多个靶标的同时扩增,探针荧光基团的选择变得尤为复杂和关键。以下是对多重PCR探针荧光基团选择的四项基本原则。 一、仪器兼容性 不同品牌和型号的荧光定量PCR仪具有不同的激发光和发射光波长特性,因此荧光基团的选择必须与所用仪器相匹配。例如,ABI 7500 FAST含有5个荧光通道,而LightCycler480、Bio-Rad CFX96等仪器则可能具有不同的荧光通道数量。因此,在选择荧光基团时,需查阅仪器说明书或咨询供应商,了解仪器支持的荧光基团种类。 二、避免相互干扰 多重PCR中,不同靶标的探针荧光基团必须能 ………………………………

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