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生命科学技术摘集
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生命科学技术摘集
单细胞测序:从Drop-Seq到10xGenomics
生命科学技术摘集
·
公众号
· · 2024-08-08 08:31
文章预览
高通量单细胞捕获有两大策略, 一种是微流控芯片技术 ,以10X Genomics、Drop-seq、inDrop为代表 。 另一种,微孔板(microwell)技术,以BD Rhapsody、Seq-Well为代表 。 从诞生年代来看,两者不分伯仲,10X Genomics起源自Drop-Seq技术,得益于哈佛大学研究所的工作。 微流控芯片 技术平台: 1个液滴=1个细胞+1个凝胶微球=1个RNA Seq 微流控芯片技术是将 单个细胞 和 单个凝胶微球 包裹在一个液滴内,细胞裂解释放mRNA,通过逆转录产生用于测序的带条形码的cDNA;液体油层破坏后,cDNA后续进行文库构建,使用测序平台对文库进行测序检测,即可一次性获得大量单细胞的基因表达数据,10min内自动完成上万个细胞的捕获,从而达到在单细胞水平进行表达测序的目的。 适用范围: 直径40μm 以下细胞 (受仪器管道直径限制);大规模细胞样本,适用于分群、谱系等研究 ………………………………
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