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不跑电泳就谈RNA质量好坏的,都是耍流氓!

NIRO科研喵  · 公众号  ·  · 2024-06-12 07:30
    

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前言: 最近中科院遗传所许同学有个疑问:他提出来的RNA仪器数据很好,就是荧光定量做不出来,是什么原因呢? 数据是真漂亮  我建议他跑电泳后再聊,下面是对应的电泳图: 完全降解!这样的RNA质量能做出来荧光定量才怪呢 所以:不跑电泳就谈RNA质量好坏的,都是耍流氓!因为仪器NarnoDorp2000不能区分DNA和RNA,完全降解的RNA也能读出高纯的OD比值和高浓度数据,所以仪器数据在RNA电泳图合格的前提下才有参考意义! 下面只从RNA电泳图,谈谈如何判断RNA的质量: 总RNA的提取方法主要分两种: Trizol 沉淀法 和 RNA 吸附柱法 。 一、 Trizol 沉淀法的判断标准:28:18s比例至少为1.5:1 用异丙醇沉淀,或者乙醇沉淀方法提取的RNA,因为5s小片段也可以一起沉淀,所以,一般会见到明显的5s条带,用这种方法提取见到5s条带,是正常的,不提示降解。 这个图 ………………………………

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