文章预览
来源：小桔灯网 作者：动力彩虹🌈 双链核酸的序列特异性识别对于分子诊断和原位成像至关重要。CRISPR系统已经彻底改变了基因组编辑、表达干扰和分子诊断领域。Cas蛋白介导引导RNA（gRNA），通过识别PAM序列来切割目标核酸。此外，在目标识别时，也有一些Cas蛋白对单链报告核酸表现出不加区分的切割活性。然而，CRISPR-Cas系统的PAM依赖性和脱靶效应不仅限制了其目标，但也对识别特异性提出了挑战。这激发了一种对dsDNA进行序列特异性识别的新工具。 近日，杂志Nature biotechnology上发表了一篇题为“Bacteriophage λ exonuclease and a 5′-phosphorylated DNA guide allow PAM-independent targeting of double-stranded nucleic acids”的文章。 作者发现了噬菌体λ外切酶(λExo)的酶活性。 5 ' -磷酸化的单链DNA (pDNA)可以与dsDNA和DNA-RNA双链上的互补区域结合，λExo在Mg2+存在下会将pDNA消化
………………………………
