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ELISA 即酶联免疫吸附测定(Enzyme - Linked Immunosorbent Assay),是一种常用的免疫学检测技术,主要基于抗原与抗体的特异性结合以及酶的高效催化作用。常常用于检测炎症细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6等)。接下来以常规试剂盒为例,从标准曲线绘制、样本浓度计算、数据验证、结果解释等步骤展开阐述: 1、标准曲线绘制 (1)用PBS缓冲液或试剂盒配置的标准品稀释液对标准品进行溶解浓度为1000pg/ml,然后根据实验需求进行稀释,通常会得到6~8个不同浓度(1000、500、250、125、62.5、31.25、 15.625、0 pg/ml)的标准品溶液。稀释倍数一般根据标准品的初始浓度和实验的检测范围来确定。通常地,稀释的标准品不得重复使用,未用完的标准品应按照一次用量分装后,将其放在-20~-70℃贮存,一次性使用,避免反复冻融。 (2)按照 ELISA 实验流程,将不同浓度的
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