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做qPCR实验,内参基因Ct值波动较大,如何控制内参基因Ct值波动在1个Ct值内?

NIRO科研喵  · 公众号  ·  · 2024-07-10 07:30

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在评论区看到有朋友问小编:“内参基因检测值一般会在1-2个Ct值的波动,有没有好的办法,让波动稳定在1个Ct以内呢?”看到这个问题时,小编陷入思考,原来不止小编曾经遇到类似的问题呀!看来这是比较普遍的现象。 自非洲猪瘟和新冠以后,qPCR实验得到了极大的普及,对于刚接触qPCR实验的朋友,很容易陷入“ 钻Ct值牛角尖 ”的误区。正如前面分享了文章《 qPCR实验中,除了Ct值,还需要看扩增曲线和熔解曲线吗? 》,本文简单介绍了做qPCR实验不能只看Ct值的大小,而忽略扩增曲线和熔解曲线,要通过全面评估才是准确性和关键性的关键要素。 怎么理解“Ct值”呢? Ct值 : 即Cycle Threshold,表示在qPCR扩增过程中,每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。C代表Cycle(循环),T代表Threshold(阈值)。 Ct值实际上反映了起始模板扩增达 ………………………………

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