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qPCR体系配制“高手”速成秘诀

小桔灯网  · 公众号  ·  · 2024-06-04 18:51
    

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来源:小桔灯网 不知道实验室的各位,是否会常常感慨人和人的差距怎么那么大?同样的样品、引物、仪器、试剂...师兄的数据就很好,你的就...一言难尽。 目前, 实时荧光定量PCR(qPCR)法目前已经发展成为基因定量检测使用最广泛的技术之一, 具有特异性好、灵敏度高、污染小等优势。但前期pcr体系构建的步骤(大致概括为mix分装与核酸样品添加) 繁琐重复且不稳定, 极其耗费实验员宝贵的时间和精力,并且不同实验人员或者同一实验人员重复实验, 实验结果往往差异性较大。 想要成为qPCR体系配置高手 既要 防污染: 单独的定量PCR反应制备区、加样顺序严格不混乱、反应后管/板及时直接废弃... 又要 防差错: 不可裸手触碰光学平盖/封膜、相同样品充分混匀、避免加样操作不均... 可以说,整个qPCR实验容不得一次失误,随着操作的次数越 ………………………………

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