Cell | 效率提升百倍！诺奖得主Doudna团队找到改进基因编辑的通用策略

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iNature 耐热聚类规则间隔短回文重复(CRISPR)和CRISPR相关(Cas9)酶可以提高基因组编辑效率和传递，因为延长了蛋白质的寿命。 然而，当在培养的人类细胞中使用时，嗜热嗜脂肪地芽孢杆菌（ Geobacillus stearothermophilus ）Cas9 (GeoCas9)几乎没有活性。 2024年5月22日，美国加州大学伯克利分校 Jennifer A. Doudna团队在 Cell  在线发表题为“ Rapid DNA unwinding accelerates genome editing by engineered CRISPR-Cas9 ”的研究论文， 该研究发现通过工程CRISPR-Cas9快速DNA解绕加速基因组编辑。 实验室进化的GeoCas9变体克服了这一自然限制，通过获得楔形(WED)结构域的突变，产生超过100倍的基因组编辑水平。 野生型和改良型GeoCas9 (iGeoCas9)酶的冷冻电镜(cryo-EM)结构揭示了iGeoCas9的WED结构域与DNA底物之间的扩展接触。 生化分析表明，iGeoCas9在哺乳动物(而非细菌细胞)典型的镁限制条件下加速DNA解绕以 ………………………………