His-标签蛋白纯化后洗涤/洗脱效果不好! 是什么原因造成的呢？

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来自广西大学的朋友咨询小编：为什么His-标签蛋白纯化洗涤/洗脱后会是这样子呀？还有预染蛋白marker会偏移目的蛋白这么远呢？小编觉得这是大家常遇见的问题，就想写篇关于HIs-标签蛋白纯化的文章总结 整理 ，给大家分享分享，互相学习一下！！！ His-标签蛋白纯化是一种常用的蛋白纯化技术，特别是在原核表达系统中。His-标签(组氨酸标签)由6~10个组氨酸残基组成，分子量很小(约0.84KD)，不会遮盖融合蛋白中其他蛋白的表位和结构域，也不会影响蛋白的结构和功能。以下是His-标签蛋白纯化的详细介绍： 纯化原理 His-标签蛋白纯化的原理主要基于固定化金属离子亲和层析(IMAC)。在一般或变性条件(如8M尿素)下，带有His标签的蛋白可以与琼脂糖凝胶或磁珠上的Ni2+、Co2+等过渡金属离子形成配位键而特异性结合。 图片来源 ： 网络 这些金属离子被固定 ………………………………