新型抗OX40抗体Ab18的Fc段改造与鉴定

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中文摘要 目的    对抗肿瘤坏死因子受体超家族成员4（OX40）单克隆抗体Ab18进行结构优化和生物学活性初步鉴定。 方法    采用ELISA检测Ab18与不同物种OX40的种属交叉结合活性。用流式细胞术（flow cytometry，FCM）检测Ab18与HEK293-hOX40细胞的结合活性。采用报告基因法检测Ab18的阻断活性和激动活性。采用点突变技术对Ab18抗体Fc段进行工程化改造，改变Fc段与Fc受体的亲和力。用ELISA和FCM检测其与人Fcγ受体ⅡB和人新生儿Fc受体的结合活性，用报告基因法检测改造后的Ab18及其突变体抗体的激动活性、抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）活性。 结果    Ab18抗体具有与小鼠、大鼠和恒河猴的种属交叉结合活性，相比对照抗体GBR830和KHK4083，Ab18与HEK293-hOX40的结合活性和阻断活性更强，Ab18与HEK293-hOX40的结合活性半数效应浓 ………………………………