主要观点总结
本文主要介绍了以细胞间通讯为研究主题的方法,具体涉及到外泌体介导的细胞间通讯、线粒体转移和配体-受体结合三种作用方式的研究方法。这些方法包括外泌体的分离、鉴定和表征,外泌体示踪细胞间传递方法,外泌体成分的组学分析,线粒体分离和鉴定,线粒体共培养方法,配体-受体结合的研究方法等。
关键观点总结
关键观点1: 外泌体介导的细胞间通讯研究方法
包括外泌体的分离、鉴定和表征方法,外泌体示踪细胞间传递方法,外泌体成分的组学分析,以及外泌体与受体细胞共培养方法等。
关键观点2: 线粒体转移研究方法
包括线粒体的分离和鉴定,线粒体共培养方法,细胞共培养体系下的线粒体标记和示踪,以及单细胞测序结合MERCI分析等。
关键观点3: 配体-受体结合研究方法
包括阻断性抗体阻断受体活化,中和性抗体降低配体浓度,配体与受体在组织与细胞共培养体系下的染色与共定位,免疫共沉淀验证配体-与受体结合,表面等离子共振检测配体-受体结合强度,以及分析配体与受体结合后受体构象改变等方法。
文章预览
以 外泌体(或者胞外囊泡)及其成分(如 RNA 、脂质和蛋白) 、 线粒体转移(比如隧道纳米管介导的) 、 配体 - 受体(比如膜配体、分泌性配体以及膜受体) 为代表的“细胞 - 细胞间通讯( Cell-Cell Communication , CCC )”是很多研究团队关注的主题,也是这几年国自然项目和高分文章经常关注的领域。 今天来盘点这三种作用方式的研究方法。 一、 外泌体介导的细胞间通讯 外泌体是细胞分泌的纳米级囊泡,携带蛋白质、 RNA 等生物分子,通过与受体细胞融合或被内吞,传递信号调节其功能。 研究方法 : 1 )外泌体分离、鉴定和表征方法 外泌体分离常用差速超速离心、密度梯度超速离心、过滤、超滤等传统方法,也可用微珠、微流控芯片等新技术。鉴定时需检测外泌体的蛋白标志物,如 CD9 、 CD63 、 CD81 等,常用 Western blot 。表征包括形态和粒径
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