CHO细胞衍生的细胞外囊泡和细胞物质在单抗灌流生产过程中对过滤器污染的影响

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在生物制药的灌流生产过程中，中空纤维过滤器的污染问题一直是业界面临的挑战。尽管过滤器污染的成因复杂且难以捉摸，本研究致力于揭示细胞培养介质中特定成分——特别是中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞释放的细胞外囊泡——在这一现象中扮演的角色。我们的研究发现，灌流过程中产生的直径介于 50 至 200 纳米的 CHO 源性小细胞外囊泡 (sEV) 的数量减少，往往预示着跨膜压 (TMP) 的升高和产品筛分效率的下降，这暗示 sEV 可能在过滤器内部积累，进而导致污染。 利用扫描电子显微镜和氦离子显微镜的观察，我们在中空纤维切向流过滤过滤器 (HF-TFF) 的膜孔隙和污染区域发现了类似 sEV 的结构。此外，我们还发现，在灌流培养的第 28 天，TMP 的升高与污染区域的面积百分比存在正相关性。通过能量色散 X 射线光谱分析，我们进一步确认了污染斑块中富含细 ………………………………