为何现在如此成熟的PCR试剂，对有些「高GC含量目的条带」还是无法P出呢？

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每天做实验小心翼翼，时时担心提取的 DNA 被污染、被降解。终于，废了九牛二虎之力，好不容易提取到高质量的 DNA，然而 PCR 仍然 P 不出来条带。是试剂加漏了吗？是酶失活了吗？换上新试剂，冰上重来一次，然并卵，不仅 P 不出来，更重要的是也不知道为啥 P 不出来，贝多芬都弹不出我的悲伤！ 图片来源：网络 算了，悲伤往事不再提，今天 NIRO 就总结教训，带你啃一啃 PCR 的这个硬骨头吧！PCR 扩增不出来条带的原因有很多，诸如引物设计有误，DNA 模板已降解，酶失活或者有杂酶污染，缓冲液条件不当，模板 DNA 的 GC 含量太高等《 PCR实验中，除了Taq DNA聚合酶，缓冲液(Buffer)真的那么重要吗？Buffer要怎么优化呢？ 》。上述提到的大部分原因，基本上可以通过换PCR试剂得到解决，但是对于高 GC 含量的样本，往往很难有好办法的一次性P出所需条带 ………………………………