荧光定量PCR技术

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喜欢就关注我吧，订阅更多最新消息 1．TaqMan技术 TaqMan技术是PE公司开发的一种基于PCR技术为基础的荧光定量技术。它利用了Taq酶的5’－3’外切酶活性，合成一对能与PCR产物杂交的探针，探针的5’端标记一个荧光报告基团R（reporter），3’标记另一个荧光淬灭基团Q（quencher）。其中3’端荧光基团Q通过能量共振能够吸收5’端荧光基团R发出的荧光，因此正常情况下该探针检测不到的5’端R基团发出的荧光，只能检测到3’端Q基团的荧光信号，但当溶液中有PCR产物（模板）时，该探针与模板结合，激活Taq酶的5’外切酶活性，将探针5’端连接的R基团从探针上切割下来，从而发出荧光，切割的荧光分子数与PCR产物的数量成比例。因此根据PCR反应液的荧光强度即可计算出初始模板的数量。如图1所示。TaqMan技术来所面临的一个最大的问题是探针的线性结构导 ………………………………