实验解析｜Westen Blot实验的内参基因选择的经验分享

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类比与RT-qPCR实验，Westen blot实验是从蛋白水平检测基因的表达情况，而在检测过程中内参基因的表达是相对恒定的，因此我们在探究目的基因受实验处理影响表达时需要挑选适合的目的基因作为内参，再进一步与实验对照组比较目的基因的相对表达量。 目前在实验中比较常用的内参基因主要为GAPDH（36KDa）、β-actin（42KDa）、β-tubulin（50-55KDa）。 （1）GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶） GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是在细胞代谢糖酵解中起关键作用的酶，由4个30-40kDa的亚基组成，检测条带大约在36kDa，通常表达量较高，在相同的细胞或组织中的表达量比较恒定。但是在缺氧和糖尿病等疾病情况中，GAPDH表达可能会发生变化，因此在这些情况下不推荐作为内参。 （2）Actin（肌动蛋白） Actin是构成细胞骨架的主要蛋白之一。最常用作内参蛋白的是β-actin，检测 ………………………………