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0 1 背景介绍 酵母单杂交技术衍生于酵母双杂交GAL4系统,是一种在酵母细胞内分析鉴定转录因子与目的基因启动子相互作用的有效方法,被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控,如鉴别DNA结合位点、发现潜在的结合蛋白、分析DNA结合结构域信息等。 02 原理简介 将已知的特定顺式作用元件或目的基因的启动子序列构建至最小启动子(Minimal promoter, Pmin)的上游,报告基因连接在特定顺式作用元件或目的启动子下游,构成包含目标DNA元件(Bait sequence)的诱饵载体。将转录因子构建至可以表达转录激活结构域(AD)的载体上,表达形成融合猎物蛋白(Prey)。如果特定顺式作用元件或目的启动子和转录因子结合就会激活Pmin,从而促使报告基因表达。因此,可以通过检测报告基因表达与否来判断特定顺式作用元件或目的启动子与转录因子是否发生互作
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