实验解析｜DNA凝胶回收常见问题

文章预览

DNA凝胶回收即从琼脂糖凝胶中提取DNA的过程，大致经过切胶、溶解、离心分离等步骤，常规回收过程一般使用试剂盒实现，其常见问题及注意事项如下： 1.对于需要回收的DNA，跑胶时应选择梳齿宽、薄的梳子，同时保证上样量充足。 2.切胶过程中，若不确定条带具体位置，可在紫外照射下进行，快速切胶，防止紫外照射时间过久导致DNA变性。同时，切胶的刀片保持干净，防止污染，切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积，但务必保证将条带胶全部切下，将切下的胶块切小后全部收集到离心管内。 3.加入溶解液溶胶时，在55℃-65℃的水浴（具体温度由说明书决定）中进行，同时2-3min震荡混匀一次，保证琼脂糖凝胶充分溶解，否则易导致回收效率过低，正常全部溶解后溶液呈淡黄色。 4.过柱过程中保持柱子和回收管干净，每一步充分离心，同时保 ………………………………