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单细胞相关PCR中的神奇分子:甜菜碱,PEG,DMSO

生命科学技术摘集  · 公众号  ·  · 2024-08-05 08:16

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甜菜碱 ,也称为三甲基甘氨酸或 N,N,N-三乙基乙酸铵,是具有三个甲基的甘氨酸类似物。甜菜碱是一种PCR增强试剂,广泛用于提高PCR产物的产量和特异性,特别是用于扩增GC含量丰富的靶标或形成二级结构的靶标,导致产量低。甜菜碱促进DNA链分离 减少富含GC区域的二级结构。 甜菜碱已广泛用于优化多重和“长而准确”的聚合酶链反应 (LA-PCR)。据报道,向PCR混合物中添加1.0-1.7M甜菜碱水溶液可减少 碱基对组成对DNA链熔解的依赖性。 在利用TSO反应的SMART单细胞测序技术中,通常会添加甜菜碱。 多个研究表明, 7.5%-12% 的 PEG6000 或 PEG8000 能够提高单细胞测序中捕获的基因数。通过模仿(宏观)分子拥挤,即通过减少有效反应量来提高酶反应速率; DMSO (二甲基亚砜)是一种有机分子,在PCR中具有几个重要功能。DMSO在PCR中的实际功能是它与细胞嘧啶残基处 ………………………………

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