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Western blot 之制胶技巧,易翻车点及其解决方法汇总

生物学霸  · 公众号  · 生物  · 2025-04-24 17:30
    

主要观点总结

文章详细描述了SDS PAGE凝胶制备的过程,包括玻璃板梳子的清洁、制胶试剂的准备、制备分离胶、制备压缩胶及插梳子和凝胶的暂存。同时,文章还提到了制胶过程中可能遇到的问题和注意事项,以及分享了相关领域的专业交流群和资料包。

关键观点总结

关键观点1: SDS PAGE凝胶制备的重要性及步骤

高质量的SDS PAGE凝胶是WB实验成功的关键之一。文章详细描述了从玻璃板梳子的清洁到凝胶制备完成的整个过程。

关键观点2: 制胶试剂的注意事项

文章提到了制胶过程中所使用的各种试剂的注意事项和保存方法,如避免长时间使用热风、试剂的有效期、试剂的保存等。

关键观点3: 制胶过程中的常见问题及解答

文章提到了在制胶过程中可能遇到的问题,如胶的质量、酒精压胶的技巧等,并给出了相应的解答。

关键观点4: 专业交流群和资料包的分享

文章还提到了为科研用户提供的前沿资讯、实验方法、选品推荐等服务,并分享了不同领域的专业交流群和资料包的获取方式。


文章预览

来源:丁香实验 说到 WB 制胶,相信很多同志都有说不尽的翻车故事。 俗话说的好,工欲善其事必先利其器,SDS PAGE 凝胶就是我们做 WB 要利的器,因为高质量的胶是跑出漂亮条带的重要前提之一。 今天我们就来探讨一下制胶这个事。  一、SDS PAGE 凝胶制备  1、玻璃板梳子的清洁 先用自来水浸泡 5 分钟,洗洁精清洗,注意厚玻璃板两侧沟槽容易残留胶,可以用尖锐的东西轻刮,然后用自来水冲洗干净泡沫,再用纯水冲洗即可,37 度烘干或者吹风筒吹干,注意别用热风长时间近距离吹,厚玻璃板两侧的边条是用粘胶粘在一起的,高热会使粘胶融化,久而久之可能引起密闭性不良甚至边条脱落。  2、制胶试剂准备超纯水,30% 丙烯酰胺,pH8.8Tris-HCl,pH6.8Tris-HCl,10%SDS,10% 过硫酸铵(APS),TEMED,还有 95% 酒精(压胶用)。 注意试剂的有效期,是否澄清 ………………………………

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