IP 条带离家出走？这 5 个因素最容易被忽视，排查表拿走不谢

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科研日记 2025.03.27 重复了三次 IP 实验，Input 条带清晰，但 IP 组信号弱到看不见……得挨个排查， 裂解液成分需要优化 ，但后期还会有 抗体结合效率低、蛋白复合体解离、或者存在竞争性结合 的问题，防不胜防啊。回想起来大师姐的 IP/Co-IP 几乎次次成功，但她的 protocol 从来不让人看，emmm，要不明天去偷一下试试 （文末查看 IP 实验信号弱的原因与解决方案） 在纯化出高活性蛋白与捕获真实互作信号等实战中，科研人总是面临许多难点： 如何避免 IgG 对照组与 IP 组同步出带，证明特异性结合？ 低丰度蛋白互作信号弱，怎样提高富集效率？ IP 后 WB 检测发现条带位置偏移，是降解还是修饰导致？ 如何根据目标蛋白的特性选择标签位置，维持互作特异性的同时提升纯化效率？ 如何通过洗脱条件调整维持蛋白的稳定性，避免纯化过程中降解？ 丁香 ………………………………