微生物药敏试验（一）纸片扩散法

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一、定义及原理 纸片扩散法‌（又称K-B法） 是一种常用的微生物药敏试验方法，主要用于检测微生物对抗生素的敏感度。其基本原理是将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有致病菌的琼脂平板上，药物在琼脂中扩散，形成浓度梯度，从而在纸片周围形成抑菌圈。抑菌圈的大小反映了细菌对药物的敏感程度，抑菌圈越大，表示细菌对该药物的敏感度越高。 二、试验步骤 1.待测菌株接种物制备：从过夜孵育的平板上挑取菌落，制成菌悬液，调整浊度至0.5麦氏单位（MCF）（ 相当于1.5×10^8cfu/m） 。 2.接种平板：用无菌棉签蘸取菌悬液，均匀涂布在琼脂平板表面，涂布三次，每次旋转平板60度，确保菌液覆盖整个琼脂表面。 3.放置测试药敏纸片：将抗菌药物纸片贴于已接种细菌的琼脂表面，纸片需分布均匀（用镊子轻压使其贴平），两纸片之间圆心距离不少于24mm ………………………………