神奇的DNA磷酸化酶

文章预览

我们在前面的一篇介绍DNA末端修复和A-tailing的原理及相关酶的文章( 文库构建中DNA片段化及末端修复那些事 )，其中就涉及到T4 PnK磷酸化酶，它就是本文的主角。 T4多聚核苷酸激酶 ，即 T4 polynucleotide kinase ，是一种源自噬菌体T4的酶。它具有双重活性： 5’磷酸化活性和3’去磷酸化活性 。它的主要功能包括： 1. 5’磷酸化活性 ：能够将ATP的γ-磷酸基团转移到DNA或RNA的5’端羟基上，从而在5’端添加一个磷酸基团。这个功能对于DNA/RNA修复、重组和连接等分子生物学实验中至关重要。其他NTP也可产生相同的反应：5'-OH + NTP → 5'-P + NDP。上述的磷酸化反应是可逆的。当缺失ATP并且存在ADP的情况下，T4 Polynucleotide Kinase可以显示出5'磷酸酯酶的活性，催化单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3'磷酸基团的单核苷酸的5'磷酸基团向ADP的转移形成ATP。其他NTP也可产 ………………………………