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Actin 不灵了?PNAS 告诉你为什么做 WB 一定要跑双内参

生物学霸  · 公众号  · 生物  · 2024-07-02 17:33
✦•✦做 WB 的同学都知道用 Actin 条带作为内参来反映  WB 实验的上样量和结果的可靠性,可你是否知道, Actin 在一些特定条件下也会「失灵」?✦•✦近期,PNAS 上刊发了一篇题为 AMBRA1 levels predict resistance to MAPK inhibitors in melanoma 的论文通过大量 WB 「双内参」来精准检测 AMBRA1 和 FAK1 的蛋白表达水平,以确保实验结果的准确性和可重复性。从而揭示了 AMBRA1 蛋白水平是预测黑色素瘤对 MAPK 抑制剂反应的重要生物标志物,并为开发针对 MAPK 抑制剂抗性的新治疗策略提供了可能的靶点。通览文中的 WB 数据结果,其中之一的内参就是我们常用的看家蛋白(文中分别使用了 Actin 或Vinculin 或 β-tubulin),另外一个固定使用的内参是 Stain-Free 。采用「看家蛋白」+「Stain-Free」的双内参模式为 WB 实验数据保驾护航。从文献中的图片结果来看,也是「赏心悦目」 ………………………………

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