单克隆抗体的制备

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一：抗原乳化 抗原溶液必须与 CFA( 完全弗氏佐剂 ) 或 IFA( 不完全弗氏佐剂 ) 完全乳化才有免疫效果。判定是否完全乳化的方法是 : 取一小滴乳状液，使其落到冰水表面，如果乳状液呈团状漂浮在冰水上不分散，则已完全乳化。如液滴分散，继续混合乳化至完全乳化。 目前实验研究中应用最多的是弗氏佐剂 (Freund adjuvant) 。弗氏佐剂可以分为不完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂。不完全弗氏佐剂是液体石蜡与羊毛脂按照 1:1~5:1( 通常为 2:1) 混合而成。在不完全佐剂中加卡介苗或死的结核分枝杆菌，即为完全弗氏佐剂 (FCA) 。 一般第一次免疫动物时按等体积的弗氏佐剂和抗原进行乳化，第二次或第三次免疫时可以用不完全佐剂或不用佐剂。 在免疫动物前，先将弗氏佐剂与抗原按1:1的比例混合，制备成“油包水”乳状液注射入动物体内时一定要保持乳化状态 ………………………………