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层析柱的装填是层析分离技术中的一个关键环节,其流程与技巧对于确保层析柱的分离效果和柱效至关重要。以下是层析柱装填的详细流程与技巧: 一、装填前准备 确定柱体积与填料体积: 根据层析柱的内径及高度,确定所需的装柱体积及柱床高度。通常,填料装柱体积不超过最大柱体积的70%。 根据装柱体积和填料的压缩因子(通常在1.1~1.18之间)计算所需层析介质(沉降胶)的用量。 填料准备: 如果填料是以固态干粉形式提供的,需要先进行充分溶胀(用水或平衡液),并静置沉降分层,去除液面上悬浮的细小填料颗粒。 将填料与适量的纯化水或平衡液混合制成胶悬液,建议将胶悬液浓度控制在50%~70%。 进行换液操作,即静置填料后待填料与缓冲液充分分层,倾去上层保护液,补加适量纯化水,重复两到三次。 进行除气/匀浆操作,可通过匀
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