为什么WB实验中，目的蛋白会出现“多条带”或“条带大小与预期不符”

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图片来源：NIRO科研喵学术交流群 我们都知道 Western Blotting，即蛋白质印迹或免疫印迹，是一种基于抗原-抗体特异性结合的生物化学分析技术，利用蛋白质的电泳迁移率差异，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)将蛋白质分离，随后将分离的蛋白质转移到固相载体(如PVDF膜或NC膜)上。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。 但近期，在小编的群里看到有小伙伴在问关于Western Blotting的相关问题，如上述图片中的问题：“为什么会出现条带空斑”、“条带出现缺失”、“条带大小不符合预期”等，这些都是常见且容易忽略的细节而造成的问题。 本文主要从制胶开始逐步梳理每个细节，同时介绍 Western Blotting实验中 ………………………………