Nat. Chem. Biol. | 从头合成[2Fe-2S]簇

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大家好，本周推荐一篇发表在Nat. Chem. Biol.上的文章，The ISC machinery assembles [2Fe–2S] clusters by formation and fusion of [1Fe–1S] precursors。本文的通讯作者是来自巴黎萨克雷大学的Benoit D’Autréaux 教授。 细菌 ISC合成机器由 IscU、IscS、Fdx和FdxR组成，与真核生物的 ISCU2、NFS1、FDX2 和FDXR同源。 真核生物中铁硫簇组装的机制较为清晰，然而尚不清楚该机制能否应用到细菌当中。 本文作者体外构建了大肠杆菌的铁硫簇组装机器，逐步实现了[2Fe-2S]的组装。 首先，作者分别从组装机器中去除了4个蛋白质，并用紫外-可见分光亮度法检测铁硫簇的特征吸收峰。 去除IscU或IscS后没有铁硫簇产生，这与IscU作为支架蛋白和IscS作为含硫蛋白功能相符。 作者通过圆二色光谱法证明合成初始IscU与单个二价铁结合。 接着，烷基化-还原带移的实验证明了在添加半胱氨酸后，IscS生成 ………………………………