有哪些措施可以提高DNA的「连接效率」

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图片来源：网络 DNA 连接是现代分子生物学流程中的关键步骤。DNA 连接酶可催化双链 DNA 上由单链断裂产生的相邻残基之间的切刻连接，也可催化双链断裂的连接。相邻 DNA 残基的 3'-羟基和 5'-磷酸基间形成磷酸二酯键，分三步完成：首先，连接酶与游离 ATP 反应进行自腺苷化；接着，腺苷基团转移到“供体”DNA 链的 5'- 磷酸基末端；最后，腺苷化的 DNA 链的 5'- 磷酸基末端与相邻 DNA 链的 3'-羟基发生反应并释放 AMP，形成磷酸二酯键。在生物体内，DNA 连接酶是 DNA 复制和修复的关键酶。在实验室中，DNA 连接被用于克隆和非克隆实验。 一、优化连接反应条件 (1) 温度控制:  DNA连接酶的最佳工作温度通常是25度左右，即室温。然而，对于DNA片段的连接，最佳温度可能更低，如1度左右。因此，可以在室温下孵育一段时间后，将混合物置于4°C冰箱中过夜，以 ………………………………