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实验十二 | RNA质量检测 (知识分享)

NIRO科研喵  · 公众号  ·  · 2024-09-20 07:30

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作者 | 易继财等 来源 | NIRO(ID:NIRO-keyanmiao) 编辑 | 澹泊研究僧 提取总 RNA 后,需要对 RNA 的纯度和浓度进行检测。检测 RNA 的方法主要有两种即光密度法和电泳法。光密度法是利用分光光度计测定 RNA 的紫外吸收值,即OD230、OD260和OD280。对于高纯度的RNA样品,OD260与OD280的比值应介于1.8~2.0之间(有些文章会写1.8-2.1之间,其实在2.1也是没有问题的)。如果比值偏低,表明 RNA 样品中可能存在蛋白质或苯酚的污染;OD260与OD230的比值应大于 2.0,否则表明 RNA 可能存在异硫氰酸胍的污染。依据OD260值大小可以计算出RNA的浓度。 一般来说,1 OD260相当于 RNA 浓度为 40 μg/mL。 对于 RNA 的完整性,可以通过电泳进行检测。RNA 分子在凝胶中的迁移速度与其长度密切相关,一般情况下,较长的 RNA 片段移动较慢。但是,单链 RNA 分子极易通过分子内碱基配对形成复杂的 ………………………………

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