实验一 | 碱裂解法抽提质粒DNA(知识分享)

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图片来源：网络 实验目的 学习并掌握基因操作技术中最常用的载体质粒DNA的提取方法。 实验原理 质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体，在基因操作中具有重要的用途。质粒DNA的分离纯化是最常用和最基本的实验技术。质粒提取方法很多，一般都包括3个主要步骤: 细菌的培养、细菌的收集和裂解、质粒DNA的分离纯化。质粒DNA的提取方法包括碱裂解法、煮沸法、SDS法、Triton-溶解酶法等，其中最常用的是碱裂解法。 图片来源： 网络 碱裂解法提取质粒DNA具有产量高、操作快速等优点，其原理是: 在碱性溶液中，双链DNA的氢键断裂，DNA双螺旋结构遭到破坏而发生变性，但是由于质粒DNA的分子量相对较小，而且呈环状超螺旋结构，即使在碱裂解的高pH条件下，两条互补链也不会完全分离；当加入中和缓冲液时，变性质粒DNA又可恢复到原来 ………………………………